在常见实验呢中,有很多不当操作情况下都会影响抗原—抗体反响的,以elisa试剂盒为例,为您解析这些要素别离来自哪里:
抗原—抗体结合进程可分为两个阶段:一阶段为特异性结合阶段,此阶段反响迅速,在数秒钟至数分钟内完成,但无可见反响;第二阶段为可见反响阶段,历时数分钟至数小时,此阶段易受以下要素的影响。
一、电解质
抗原和抗体别离有对应的极性基团,能彼此吸附并由亲水性变为疏水性。电解质的存在可使抗原—抗体复合物失掉电荷而凝聚,呈现可见反响。故免疫学实验中多采用生理盐水稀释抗原或抗体。
二、酸碱度
抗原—抗体反响zui适pH值规模是6—8。超出此规模可影响抗原、抗体的理化性状,呈现假阳性或假阴性。
三、温度
适当的温度可增加抗原与抗体分子磕碰的时机,加快二者结合的速度。抗体抗原反响的zui适温度为37℃。
此外,适当振荡或拌和也可促进抗原—抗体分子的接触,提高结合速度。
根据抗原的性质、结合反响的现象、参加反响的成分要素,可将抗原—抗体反响分为凝集反响、沉淀反响、补体参加的反响、采用符号物的抗原—抗体反响等。近年来随着免疫化学、细胞生物学和分子生物学的开展,以及各种现代高新技能在免疫学中的使用,使免疫学技能建立了许多微量、快速、特异、灵敏并能进行自动化检测和数据分析处理的新方法。