细胞裂解液各成分的作用:
1、第一种50mmol/L Tris-HCl是缓冲液,保证细胞裂解时PH值也能稳定,Tris是一种有机碱。
2、第二种1.0 mmol/L EDTA是一种金属螯合剂。
3、第三种150 mmol/L NaCl是等渗体系电解质,用于协调细胞膜内外离子平衡。
4、第四种0.1% SDS是十二烷基硫酸钠,是一种表面活性剂和还原剂,有增溶作用。
细胞裂解及方法简介:
细胞裂解是改变细胞通透性和活性的重要实验方法。主要分为化学法和机械法,前者比较温和,后者虽然产量高,但反应更剧烈,很有可能造成细胞中的DNA断裂。
裂解方法包括化学裂解、酶裂解和机械裂解。化学裂解和酶裂解通常是比较温和的方法,通常会很少使DNA 断裂。这两种方法(包括SDS 和溶菌酶处理等)提取纯化DNA中常用的方法。
机械裂解可以更均一的裂解细胞,同化学裂解相比,机械处理具有更高的裂解效率和更低的选择性。机械处理可以更剧烈和全面的裂解细胞,但也会造成DNA 的断裂。