BI胎牛血清组份的复杂性及作用机理的关联性,使得人工无血清培养基添加物想要模拟胎牛血清组份的作用就难上加难了。但随着细胞生物学及发酵制药工业的发展,成本及洁净程度的要求下,势必会有新的人工替代试剂出现,而这需要我们科研人员的共同努力。
BI胎牛血清使用中遇到的常见问题总结:
问:加到培养基中的BI牛血清必须灭活吗?
答:不是必须的,看做什么实验了。
问:BI胎牛血清(Bioind胎牛血清)灭活是56℃ 30分钟吗?
答:如果用于培养大多数的肿瘤细胞,血清一般是不需要灭活的,这样可以有效保存血清中的生长因子。 但是如果用于培养一些表面具有补体受体的细胞,如内皮细胞,血清是需要灭活,一般是56℃,30min。
问:我要做滋养细胞培养,胎牛血清要灭活吗?
答:进口的一般都已灭活,国产的不一定,还是灭活一下再用较安全。
问:我用病毒上清转染细胞,培养用的血清需要灭活吗?因为血清中可能有些补体和抗体,是不是会影 响转染?我想未灭活的血清中含些抗体补体可能会和病毒相结合,影响转染,正确吗?细胞是单核细胞白血病细胞, 病毒是病毒包装细胞PT67收集的病毒上清。为什么要用无血清培养基加病毒孵育几小时,目的是什么?
答:血清一定要灭活,可以先用无血清培养基加病毒孵育几小时以后再加血清。避免杂蛋白对病毒和宿主 结合过程的干扰,一般是2-6小时,根据细胞的状态决定。血清不一定需要灭活,灭活的目的是将血清中的补体灭活 !这要根据实际情况而定,如果没有把握那就灭活吧,也不麻烦56度半个小时。
问:(1)我买的是BI胎牛血清,要灭活吗?有些说法是需要,有些说直接解冻后就可以加入到培 养基中;我配制胰蛋白酶液,用的是D-PBS,有关系吗?
答:关于BI胎牛血清的热灭活,是很多人感兴趣也存在一定争议的话题。大多数实验室将血清的热灭活还是作为 常规来执行,因为有两个作用,第一是灭活补体,第二是灭活血清中可能存在的支原体。但是实验者并没有考虑热处 理对血清中的生长因子 氨基酸等成分带来的负面影响。