蛋白酶K是一种从白色念珠菌分离出来的强力蛋白溶解酶,具有很高的比活性,是DNA提取的关键试剂。该酶在较广的pH范围(4〜12.5)内及高温 (50〜70°C)均有活性,用于质粒或基因组DNA、RNA的分离。在DNA提取中,主要作用是酶解与核酸结合的组蛋白,使 DNA游离在溶液中,随后用不同方法进行 抽提,除去杂质,收集DNA。EDTA等螯合剂或SDS等去垢剂均不能使之失活。
蛋白酶K的应用:
蛋白酶K已广泛应用在皮革、毛皮、丝绸、医药、食品、酿造等方面。皮革工业的脱毛和软化已大量利用蛋白酶,既节省时间,又改善劳动卫生条件。蛋白酶还可用于蚕丝脱胶、肉类嫩化、酒类澄清。临床上可作药用,如用胃蛋白酶治疗消化不良,用酸性蛋白酶治疗支气管炎,用弹性蛋白酶治疗脉管炎以及用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶对外科化脓性创口的净化及胸腔间浆膜粘连的治疗。加酶洗衣粉是洗涤剂中的新产品,含碱性蛋白酶,能去除衣物上的蛋白污物,但使用时注意不要接触皮肤,以免损伤皮肤表面的蛋白质,引起皮疹、湿疹等过敏现象。
蛋白酶K的保存方法:
保存:保存在-20℃冰箱里,避免反复冻融,有效保证12月。
孵育温度为55至65℃,理想孵育温度为58℃,孵育时间为15分钟至48小时;理想孵育时间为2小时。