学会热灭活胎牛血清的操作步骤,有助于你今后的使用
发布日期:2021-07-06 浏览次数:1929
热灭活胎牛血清介绍: 热灭活目的是祛除血清中补体等对热敏感的物质。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。
热灭活胎牛血清产品特性:
1、内毒素含量低,三次纳米级过滤
2、严格控制批次差异
3、来源可靠、可溯源
4、每个批次提供相应检验检疫报告
5、适合各种常规细胞培养
6、干冰运输,建议存储温度为-20℃至-10℃
热灭活胎牛血清操作步骤:
①选用与血清瓶同规格的对照瓶一个。
②对照瓶内放入与血清等体积的水。
③温度预试。
对照瓶内插入2—3支经挑选的温度计(保证测试温度的准确性),放入水浴箱中,接通电源,调节温度控制钮,使水浴箱温度所示温度保持在56℃。
④血清灭活。
血清瓶与带温度计的对照瓶一齐放入水浴箱中,待温度计所示温度上升至56℃时, 定时30分钟。
⑤大瓶血清灭活后,进行分装。
⑥保存。
分装后,抽样做无菌试验,-20~-70℃保存。
为什么要热灭活胎牛血清?
加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐试用热灭活胎牛血清。
但是,其实,有必要做热灭活吗?实验显示,经过正确处理的热灭活胎牛血清,对大多数细胞而言是不需要的。经此处理过的胎牛血清对细胞的生长只有微小的促进,或*没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了胎牛血清的质量,造成细胞生长速率降低。而经过热处理的胎牛血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是小黑点?常常会让研究者误以为是胎牛血清遭受污染,而把胎牛血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。