MEM培养基是一种基本、适用范围广的培养基,是动物细胞培养中常用的培养基之一。MEM培养基仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素,成分简单,主要用于贴壁细胞的培养,配方修改后也可用于其他类型细胞培养。MEM含NEAA(非必须氨基酸)的培养基,是在MEM培养基的基础上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(门)冬酰胺、L-天(门)冬氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸和甘氨酸7种NEAA,能降低细胞培养时细胞自身生产非必须氨基酸的副作用,有效促进细胞增殖代谢。 MEM培养基操作步骤:
1.配置前准备:配置培养基新制备的milli water。调节pH值的酸碱溶液也应该使用这种水配置。制备培养基的器皿清洗干净,并用milli water润洗两次。
2.溶解培养基:取5%终体积的milli water,加入到1L玻璃杯中,将干粉培养基倒入烧杯,水洗包装袋内面两次,倒入培养液中。磁力搅拌助溶。
3.补加试剂:根据包装袋说明加入NaHCO3(2.2g),HEPES(2.383,10mmol)、非必需氨基酸(可不加,10ml)。
4.加抗生素:一般抗生素终浓度——青霉素100U/ml,链霉素100U/ml。1L加入10m储备液。
5.调pH值:加水到1000ml,然后用HCL或者NaOH调节pH到7.2。
6.过滤除菌:采用0.22um滤膜。过滤后分装于小瓶中(100或200ml)。过滤后pH值一般上升0.1-0.3。
7.加小牛血清:根据培养基配置的量将小牛血清分装,冷冻保存(-20度)。临用前将加入小牛血清10%。
MEM培养基的一些基本知识点先介绍到这里了,如果您还想要了解更多内容,欢迎来咨询我们。